Remerciements
Présentation de la thèse
A) Introduction
1) Les Staphylocoques
1) Généralités sur les Staphylocoques
2) Aspects cliniques et épidémiologiques des infections causées par
S. aureus
a) Introduction
b) Les souches MRSA
c) Réservoirs et modes de transmission de
S. aureus
i) Les réservoirs de
S. aureus
ii) Modes de transmission
d) Les facteurs de risque
e) Prévention et contrôle des infections nosocomiales dues à
S. aureus
2) Caractéristiques microbiologiques expliquant la virulence de
S. aureus
1) Phases de croissance in vitro
2) Les facteurs de virulence chez S. aureus
a) Les toxines
b) Les adhésines
i) Structure des adhésines
ii) Maturation des adhésines
c) Interaction de
S. aureus
avec la fibronectine
i) Structure de la fibronectine
ii) Structure et propriétés des adhésines à la fibronectine (fibronectin-binding proteins : FnBPs)
iii) Mutagenèse des adhésines à la fibronectine
d) Rôle des adhésines dans la virulence de
S. aureus
i) Etudes décrivant le rôle des adhésines
ii) Le rôle des adhésines dans l'infection staphylococcique sur biomatériaux implantés
3) Régulation de la virulence chez S. aureus et réponses au stress chez les bactéries
1) Introduction
2) Les régulateurs globaux de
S. aureus
a) Le système
agr
i) L'organisation du locus
agr
ii) L'ARN III est responsable de l'activité
agr
iii) L'
agr
contient un système de transduction du signal à deux composantes
b) Le système
sar
c) Régulation des facteurs de virulence par
agr
et
sar
3) La réponse au choc thermique (heat-shock)
a) Généralités
b) Importance du facteur
s
B
c) Contribution de
s
B
à l'expression de la virulence chez
S. aureus
4) La réponse SOS et la recombinaison homologue
a) Généralités
b) La réponse SOS et la recombinaison chez
E. coli
c) La réponse SOS et la recombinaison chez
S. aureus
5) Conclusion
4) Modes d'action des fluoroquinolones et mécanismes de résistance
1) Introduction
2) Mécanismes généraux de résistance aux antibiotiques
3) Mécanismes spécifiques des fluoroquinolones sur l'enroulement de l'ADN
a) Introduction
b) Les mécanismes d'enroulement de l'ADN: rôle des topoisomérases
c) Effets des fluoroquinolones sur l'interaction Gyrase-ADN
4) Les mécanismes de résistance aux fluoroquinolones chez
S. aureus
5) Impact des fluoroquinolones et autres antibiotiques sur l'expression des facteurs de virulence chez S. aureus
5) Buts de la recherche
B) Bref rappel méthodologique
1) Avant-propos
2) Mesure de l'adhérence de S. aureus
2) Evaluation des Concentrations Minimales Inhibitrices (CMI)
3) Extraction et analyse des protéines des lysats bactériens
4) Production de phages et transduction
5) Extraction de l'ADN bactérien
6) Clonage et complémentation à l'aide d'un plasmide « suicide »
7) Activation des promoteurs des gènes
fnbA
et
fnbB
par des concentrations sous-inhibitrices de ciprofloxacine
C) Augmentation de l'Adhérence de
S. aureus
Résistants aux Fluoroquinolones par des Concentrations Sous-Inhibitrices de Ciprofloxacine (Article N°1)
1) Avant-propos
2) Profils d'adhérence
3) Analyse quantitative des adhésines à la fibronectine par Western Blot et densitométrie
D) Induction des Adhésines à la Fibronectine par la Ciprofloxacine chez
S. aureus
résistants aux fluroroquinolones (Article N°2)
1) Avant-propos
2) L'adhérence de souches cliniques résistantes est aussi augmentée après croissance en présence de ciprofloxacine
3) Adhérence de souches de
S. aureus
résistantes aux fluoroquinolones sur des lamelles explantées des animaux
4) Activation des promoteurs des gènes
fnbA
et
fnbB
par des concentrations sous-inhibitrices de ciprofloxacine
5) L'
agr
n'intervient pas dans l'activation du gène
fnbB
par la ciprofloxacine
E) L'Effet de la Ciprofloxacine sur l'Augmentation de l'Adhérence à la Ciprofloxacine Dépend de l'Activité du Gène
recA.
(Article N°3)
1) Avant-propos
2)
sar
n'est pas impliqué dans la stimulation du promoteur
fnbB
et dans l'augmentation de l'adhérence en présence de ciprofloxacine
3) Evidence pour l'implication de
recA
dans la stimulation du promoteur
fnbB
et dans l'augmentation de l'adhérence en présence de ciprofloxacine
4) Clonage de
recA
et complémentation du mutant défectif
5) La ciprofloxacine induit une transcription rapide du gène
recA
et du gène
fnbB
dans la souche parentale RA1
F) Stimulation par Différentes Fluoroquinolones de l'Activité des gènes
fnBs
et de l'Adhérence de
S. aureus
. (travail en cours)
1) Avant-propos
2) Activation du promoteur
fnbB
chez EN1252a par des concentrations sous-inhibitrices de différentes fluoroquinolones
3) Stimulation de l'adhérence du mutant EN1252a après croissance en présence de 5 différentes fluoroquinolones
G) Discussion et conclusion
H) Bibliographie
Annexe 1